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荧光定量PCR仪常见的故障解决方法有哪些
点击次数：609 更新时间：2023-02-22
　　荧光定量PCR仪是一种利用荧光技术实现核酸分子扩增的仪器，其工作原理可概括为：
　　1）检测DNA样本：根据实验要求，将DNA样本加入实验支架，并置于定温的PCR仪中进行处理。
　　2）扩增DNA：进行PCR循环，即把该DNA样本通过反转录酶（RT）从核酸状态变成具有特定基因序列的DNA链。
　　3）检测基因序列：利用特定的含有荧光探针的PCR扩增产物，荧光探针是一种特定结合到特定基因序列上的分子标记，在接触能够激发荧光的激发剂时，能够发出荧光信号。
　　4）计算DNA浓度：通过检测得到的荧光值可以计算出该DNA样本的浓度。
　　荧光定量PCR仪常见的故障解决方法有哪些：
　　1、探头检测不准确。当定量PCR仪检测到探头信号不准确时，可以尝试使用不同的探头，或者更换探头（适当减少扩增温度也是一种可能性），以确保精确分析结果。
　　2、仪器读取不准确。当定量PCR仪读取数据出现异常时，可以检查仪器设置，例如查看相关的灵敏度调节参数并调整仪器设置，确保读取正确的值。
　　3、无法正确识别反应曲线。在定量PCR实验结束后，反应曲线可能会变得不太明显，此时可以尝试使用不同的PCR反应体系，比如改变反应温度或使用更高的模板浓度，也可以更换酶以获得较好的反应曲线。
　　4、图形异常。若定量PCR图形出现异常，则可能是工作液不够稳定或有其它问题，需要重新校准仪器。
　　5、反应期产物剩余多。如果发现反应期产物剩余过多，则需要检查仪器设置，确保温度设置正确。
　　6、实验反应效率低。在实验中可能会发现反应效率较低，这种情况下可能是由于反应温度过高或过低，使产物的活性降低，此时可以尝试使用适当的温度、模板浓度或酶类型来提高反应效率，以便获得较好的结果。

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